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dc.contributor.advisorCriado Alvarez, María Teresa, 1954-
dc.contributor.advisorMarzoa Fandiño, Juan
dc.contributor.authorCostoya Seco, Liliana
dc.contributor.otherFacultade de Bioloxía. Departamento de Microbioloxía e Parasitoloxía
dc.date.accessioned2013-12-27T08:24:42Z
dc.date.available2013-12-27T08:24:42Z
dc.date.issued2013-12-27
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/10347/9563
dc.description.abstractDebido a la pobre antigenicidad del polisacárido capsular de tipo B de Neisseria meningitidis, el desarrollo de una vacuna para la prevención de la enfermedad meningocócica causada por este serogrupo está siendo enfocado hacia el estudio de antígenos alternativos y muy especialmente de las proteínas de la membrana externa (OMPs). Estudios previos realizados en nuestro laboratorio han demostrado que algunos antígenos importantes se localizan en complejos proteicos de la membrana externa de los meningococos, y que si bien entre estos complejos los mayoritarios son aquellos formados por las porinas meningococales, existen otros complejos antigénicos de membrana que forman asociaciones de alto peso molecular en los que participa otro importante antígeno de 65 kDa (la “meningococcal stress protein” MSP63) ampliamente conservado y completamente reactivo con todas las cepas analizadas. Además, recientemente se ha detectado la existencia de otros complejos de tamaño molecular variable de los que forma parte la proteína MIP “macrophage infectivity potenciator” de 33 kDa, que en ocasiones se asocia a algunos de los complejos de porinas meningococales. También se ha comprobado que las porinas recombinantes incorporadas en liposomas se reestructuran de forma similar a como lo hacen en membranas nativas. Así pues, en este trabajo se pretendió aislar y purificar los complejos de membrana externa de N. meningitidis que contienen las proteínas MSP63 y MIP para su inclusión en nanovesículas lipídicas y posterior caracterización de la respuesta inmune generada en ratones mediante ensayos de actividad bactericida y de opsonofagocitosis, entre otros. En función de dichos objetivos el trabajo se realizó siguiendo los siguientes pasos: Aislamiento y purificación de los complejos a partir de OMVs mediante electroforesis nativa de alta resolución (hrCNE). Clonación de las proteínas MSP63 y MIP de N. meningitidis. Expresión y purificación de las proteínas recombinantes obtenidas. Inclusión en liposomas de los complejos purificados y de los obtenidos usando las proteínas recombinantes. Análisis de los proteoliposomas resultantes. Obtención de sueros inmunes en ratones, empleado los complejos obtenidos como antígenos (bien purificados a partir de OMVs, o bien reconstituidos a partir de las proteínas recombinantes mediante su inclusión en liposomas). Análisis de la respuesta inmune en los sueros obtenidos: Actividad bactericida, unión a superficie por citometría de flujo, deposición de complemento y opsonofagocitosis. Los resultados obtenidos con la proteína MSP63 derivaron en centrar el estudio en la prometedora proteína MIP, cuyos resultados, junto con los de otros autores, nos permitieron considerarla como un candidato vacunal adecuado a incluir en nuevas vacunas multicomponente contra la meningitis meningocócica.
dc.language.isospa
dc.rightsEsta obra atópase baixo unha licenza internacional Creative Commons BY-NC-ND 4.0. Calquera forma de reprodución, distribución, comunicación pública ou transformación desta obra non incluída na licenza Creative Commons BY-NC-ND 4.0 só pode ser realizada coa autorización expresa dos titulares, salvo excepción prevista pola lei. Pode acceder Vde. ao texto completo da licenza nesta ligazón: https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/deed.gl
dc.rights.urihttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/deed.gl
dc.subjectMeningitis
dc.subjectMIP
dc.subjectNeisseria
dc.titleLa proteína MIP de Neisseria meningitidis: Un candidato vacunal prometedor contra la meningitis meningocócica
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/doctoralThesis
dc.rights.accessrightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess


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